一种热稳定性好的β-葡聚糖酶

摘要

本发明公开了一种热稳定性好的β‑葡聚糖酶，该酶活性为8000‑10000U/ml，是出发菌株的2.5倍；比现有的β‑葡聚糖酶酶活力高，酶适应温度和pH值范围宽泛，热稳定性及储存稳定性均较高，特别适合工业化需求。最适作用温度为65℃，最适反应pH值5.0。本发明中的β‑葡聚糖酶由地衣芽孢杆菌制得，所述地衣芽孢杆菌（Βacillus licheniformis）β‑10‑25保藏于保藏于典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2013538。

主权项

一种热稳定性好的β‑葡聚糖酶，所述β‑葡聚糖酶具有以下特性：（1）温度：该酶温度适应范围较宽，最适作用温度为65℃，在50‑70℃之间具有较高的酶活；（2）pH：该酶最适反应pH 值为5.0，在pH值为4.0时酶活完全稳定；（3）酶活性：8000‑10000U/ml，是出发菌株的2.5倍；（4）热稳定性：该酶在60℃条件下保存1h后仍能保持80%以上酶活，70℃条件下保存10min后保持20%以上酶活；（5）存储稳定性：该酶在室温下保存6个月后酶活损失小于25%，4℃保存12个月后酶活损失小于20%；所述热稳定性好的β‑葡聚糖酶由地衣芽孢杆菌（Βacillus licheniformis）β‑10‑25生产所得，菌种保藏号为CCTCC NO: M 2013538；　　所述的一种热稳定性好的β‑葡聚糖酶，由以下方法制得：（1）地衣芽孢杆菌（Βacillus licheniformis）β‑10‑25菌种活化，一、二、三级种子培养和种子罐培养；（2）发酵罐发酵将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中，培养温度35‑45℃，搅拌速度200‑300r/min，通风量（V/V）1:1‑3,培养时间10‑15h；然后将1L经过121 ℃灭菌20 min，温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35‑45℃时恒温培养15‑20h；此时，将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐，恒温培养10‑15h；继续将1L经过121 ℃灭菌20 min，温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35‑45℃时恒温培养10‑15h；（3）发酵液经过滤、浓缩、精滤、干燥得β‑葡聚糖酶。