一种Dual-RMCE介导的TCR基因置换系统及其方法

摘要

本发明公开了一种逆转录病毒基因转移联合双重组酶介导的盒式交换（Dual-RMCE）技术介导的T细胞受体（TCR）基因置换系统及其方法，包括含有置换组件Loxp-EGFP-FRT逆转录病毒整合载体pMP71-LGFPF和含有TCR目标基因的置换载体pDRAV-3-LTCRF。该系统能够在基因组单一位点中快速进行TCR基因置换，利用体内外细胞分化技术产生大量的肿瘤抗原特异性T细胞，从而表达某一肿瘤抗原特异性的TCR分子。该技术克服了传统TCR基因治疗的问题：逆转录病毒随机整合带来的副作用和外源性与内源性TCR组合形成的自身反应性TCR，将为临床抗肿瘤T细胞免疫治疗提供一个安全可靠的新技术。

主权项

一种Dual‑RMCE介导的TCR基因置换系统，其特征在于，包括含有置换组件Loxp‑GFP‑FRT逆转录病毒整合载体pMP71‑LGFPF、含有目标TCR基因的置换载体pDRAV‑3‑LTCRF和Cre/Flp酶载体pDIRE‑iCre/Flpo。