半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法

摘要

本发明涉及半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法，包括以下步骤：(1)将预合成的双链DNA分成多个DNA片段；(2)用DNA片段设计核苷酸；(3)以核苷酸作为引物，在引物的两端分别加上序列，合成核苷酸序列，核苷酸序列通过半导体芯片制备；(4)用含有生物素标记的引物进行第一轮扩增；(5)用至少一种重组酶重组第一轮PCR产物；(6)纯化PCR混合物；(7)进行第二轮PCR，将核苷酸片段进行拼接，获得拼接后的PCR产物；(8)用设计的首尾引物，对PCR产物进行第三轮PCR扩增，获得双链DNA片段。本发明的方法成本低，一次合成的通量高。

主权项

一种半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法，该方法以半导体芯片合成核苷酸池，用合成的核苷酸池组装成双链DNA，其特征在于，包括以下步骤：(1)将欲合成的双链DNA分成多个DNA片段；(2)用(1)中获得的DNA片段设计核苷酸；(3)以(2)中的核苷酸作为引物，在引物的两端分别加上序列，合成核苷酸序列，所述核苷酸序列通过半导体芯片制备；(4)用含有生物素标记的引物进行第一轮扩增，获得第一轮PCR产物；(5)用至少一种重组酶重组(4)中获得的第一轮PCR产物，得到PCR混合物；(6)纯化(5)中的PCR混合物；(7)用(6)中纯化后的PCR混合物进行第二轮PCR，将核苷酸片段进行拼接，获得拼接后的PCR产物；(8)用设计的首尾引物，对(7)中的PCR产物进行第三轮PCR扩增，获得双链DNA片段。