一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法

摘要

一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)取伞房花耳草未开裂果实作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体在超净工作台剥开，将种子接种到MS培养基上诱导发芽得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽；(4)将所述丛生芽置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；(5)取完整的带根苗进行炼苗后移植于苗床生长一个月，再移栽至大田。采用本发明所述的培养方法得到的伞房花耳草丛生芽增殖系数达到20-30倍，获得的组培苗生根率达到98.5％，移栽苗床成活率达到95％，有效解决了伞房花耳草的规模化育苗问题。

主权项

一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15‑30min、添加了2‑3滴吐温‑20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)种子萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净工作台上剥开，将种子接种到MS培养基中，在培养温度为23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为8‑10小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6‑BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为8‑10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5‑3.0mg/L的苄基腺嘌呤6‑BA、0.1‑0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1‑1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(4)丛生芽生根培养：将步骤(3)中得到的丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段，置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基中添加0.1‑1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1‑0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(5)炼苗与移栽：步骤(4)获得带根的完整植株后，在室温为25℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2‑4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到苗床中，在苗床中生长一个月后移栽大田。