一种新型水产养殖益生菌剂及其生产方法和用途

摘要

本发明涉及一种新型水产养殖益生菌剂及其生产和用途，属于饲料添加剂、水产养殖和生物技术领域。本发明采用的菌株是枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）SZX11菌株，该菌株保藏在微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.8188。本发明是以无机盐、维生素、微量元素与枸杞、香菇、马齿苋、地锦草提取物复合而成的培养基，接种SZX11株进行好氧发酵，制成活菌含量≥2×10⁹CFU/mL的菌剂，该菌剂含有丰富的活性多糖和活菌体及其代谢产物全组分。将该菌剂混入南美白对虾饲料，对南美白对虾的肠道病害和免疫失调有良好的预防作用。可以显著提高养殖成活率和产量，显示出这种新型水产养殖益生菌剂具有广阔的应用前景。

主权项

一种水产养殖益生菌剂及其生产方法，其特征在于：该菌剂的生产方法包括如下步骤：（1）液体菌种的制备：所用菌种培养基配制方法（以1 L为例）：磷酸二氢钾1 g，磷酸氢二钾0.5 g，氯化钙50 mg，硫酸铵0.5 g，硫酸镁300 mg，硫酸锰4 mg，硫酸铜2 mg，钼酸钠0.6 mg，对氨基苯甲酸0.25 mg，生物素、维生素B1、维生素B6、烟酰胺各0.2 mg，葡萄糖6.2 g，蒸馏水1升；用氢氧化钠溶液调pH至6.8‑7.8，分装到500 mL三角瓶中，每瓶200 mL培养基，于121℃灭菌20 min；灭菌的培养基降温至30‑35℃，在无菌操作台接种斜面保存的菌种，置于恒温振荡器，恒温30℃‑35℃；转速150 r/min,避光震荡培养30 h制成液体菌种，菌种枯草芽孢杆菌含量4×10⁹CFU/mL；（2）枯草芽孢杆菌所用复合中药培养液制备方法（以1000 L为例）：选购无腐烂、虫蛀、霉变的枸杞子、香菇、马齿苋、地锦草优质干品各15 kg，投放到2000 L中药提取罐内，加水至1100‑1200 L，浸泡1 h后50‑60转/min搅拌加温，加温至100℃搅拌1 h，降温至40℃‑50℃过滤，收集滤液约1000 L；称取磷酸二氢钾600 g，磷酸氢二钾300 g，氯化钙30 g，硫酸铵300 g，硫酸镁180 g，葡萄糖1800 g，乳酸1000 mL，加入到滤液搅拌均匀，如总量不足1000 L时加水至1000 L，用氢氧化钠溶液调pH至6.8‑7.8；115℃灭菌20 min；（3）灭菌后的复合中药培养液降温至30℃‑35℃接种第（1）步得到的枯草芽孢杆菌液体菌种；接种量5%‑10%，于恒温30℃‑35℃的发酵罐中，通入净化空气发酵28‑30 h；制成液体菌悬液，菌液枯草芽孢杆菌含量≥2×10⁹ CFU/mL，即得到一种新型水产养殖益生菌剂；质检后灌装，于阴凉干燥处保存。