发明名称 |
一种猪IgG1 Fc重组杆状病毒作为猪用疫苗载体的制备方法 |
摘要 |
本发明公开了一种猪IgG1Fc重组杆状病毒作为猪用疫苗载体的制备方法,属于生物医药领域。本发明的制备方法采用克隆猪IgG Fc基因和猪瘟病毒E2基因,与杆状病毒表面展示载体连接,获得重组转移载体;重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体;重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞,收集培养物上清,获得重组杆状病毒,重组杆状病毒感染昆虫细胞,收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析;重组杆状病毒猪瘟载体在猪体做疫苗效力检验。本发明制备的表面展示猪IgG Fc重组杆状病毒在猪血清中具有较强的存活能力,可逃逸给血清补体对病毒的清除,从而提高疫苗免疫的有效抗原含量。 |
申请公布号 |
CN105039406A |
申请公布日期 |
2015.11.11 |
申请号 |
CN201510405146.9 |
申请日期 |
2015.07.10 |
申请人 |
陕西溯源农业发展有限公司;黄光东 |
发明人 |
杜恩岐;黄光东;刘阳坤;张小莺;张元元;肖龙;敬晓棋;邢贞召;赵毅 |
分类号 |
C12N15/866(2006.01)I;C12N15/40(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;A61K39/187(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/866(2006.01)I |
代理机构 |
北京轻创知识产权代理有限公司 11212 |
代理人 |
杨立 |
主权项 |
一种猪IgG1 Fc重组杆状病毒作为猪用疫苗载体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:1)克隆猪IgG Fc基因和猪瘟病毒E2基因,与杆状病毒表面展示载体连接,获得重组转移载体;2)重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体;3)重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞,收集培养物上清,获得重组杆状病毒;4)重组杆状病毒感染昆虫细胞,收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析;5)重组杆状病毒做补体拮抗活性检测;6)重组杆状病毒猪瘟载体在猪体做疫苗效力检验。 |
地址 |
710000 陕西省西安市经济技术开发区凤城九路海荣名称二期62幢2单元1803室 |