采用毛细管电泳分离-二极管阵列检测技术拆分外消旋2-氯丙酸的方法

摘要

本发明公开了一种采用毛细管电泳分离-二极管阵列检测技术拆分外消旋2-氯丙酸的方法: 将手性拆分剂、有机溶剂和阳离子表面活性剂分别加入所配制的缓冲溶液中，超声混匀，即得毛细管电泳运行缓冲溶液；以此缓冲溶液作为电泳介质进样拆分，可得R-2-氯丙酸和S-2-氯丙酸单体；根据色谱图峰面积可计算对映体过量值；并根据该值的大小对产品质量进行监控；本方法可以达到基线分离R-2-氯丙酸和S-2-氯丙酸单体，具有分离度好、成本低，操作简便的特点。

主权项

一种采用毛细管电泳分离‑二极管阵列检测技术拆分外消旋2‑氯丙酸的方法，其特征在于包括下述步骤：（1）缓冲溶液的配制:将浓度为100‑150 mmol/L的磷酸溶液， 用0.2‑0.4 mol/L的Tris缓冲液调节至pH 6.0‑8.0，即得；（2）电泳运行缓冲溶液配制：将手性拆分剂、有机溶剂和阳离子表面活性剂分别加入到步骤（1）所配制的缓冲溶液中，超声混匀，即得毛细管电泳运行缓冲溶液；所述手性拆分剂为β‑环糊精或2‑HP‑β‑CD，其浓度在缓冲溶液中分别为β‑环糊精25 mmol/L或2‑HP‑β‑CD 110 mmol/L；所述有机溶剂为甲醇、无水乙醇或乙腈中的一种，在缓冲溶液中的体积分数为3%‑10%；所述的阳离子表面活性剂为CTAB，其在缓冲溶液中的浓度为0.2 mmol/L；（3）R/S‑氯丙酸的标准储备液：用超纯水分别配制R‑2‑氯丙酸和S‑2‑氯丙酸标准储备液,浓度为20‑50 mmol/ L，储存于‑ 5℃ 冰箱中备用；（4）待拆分样品的前处理：取外消旋2‑氯丙酸粗品，减压蒸馏得2‑氯丙酸纯品，‑ 5℃ 冰箱保存备用；（5）R‑2‑氯丙酸和S‑2‑氯丙酸保留时间的测定：取步骤（3）所配制的R‑2‑氯丙酸和S‑2‑氯丙酸标准储备液，稀释至1.0 mmol/ L，分别进样进行分离，即得到R‑2‑氯丙酸和S‑2‑氯丙酸保留时间参数；（6）拆分外消旋2‑氯丙酸产品：取步骤（4）所得2‑氯丙酸纯品稀释至1.0 mmol/ L，以步骤（2）配制的电泳运行缓冲溶液作为电泳介质进样拆分，可得R‑2‑氯丙酸和S‑2‑氯丙酸单体；根据色谱图峰面积可计算对映体过量值；并根据该值的大小对产品质量进行监控。