一种盐酸二甲双胍含量的测定方法

摘要

本发明涉及一种二甲双胍在细胞内/外和线粒体内/外的检测，检测二甲双胍在肿瘤细胞的药物浓度，以及检测二甲双胍是否能够进入到肿瘤细胞线粒体,动态地观察细胞内外和线粒体内外药物浓度的变动情况,验证了二甲双胍能够进入肿瘤细胞内及其线粒体内，对研究药物浓度,细胞生理参数和环境理化性质之间的动态变化规律具有重要意义，为进一步研究二甲双胍抗肿瘤作用的机制奠定了一定基础。

主权项

一种线粒体内的盐酸二甲双胍含量的测定方法,包括：1)取盐酸二甲双胍固体脂质纳米粒配置浓度为0.4‑10mM的盐酸二甲双胍溶液，通过细胞给药后，收集细胞样品；2)加入线粒体分离试剂，悬浮细胞，匀浆，离心，保留底部残余物，取上清；再次离心，去除上清，此次离心沉淀即为分离得到的细胞线粒体，合并此次离心的上清液与前一次离心的底部残余物，为线粒体外成分；3)向线粒体滴加线粒体裂解液，按所建立HPLC法进行测量，测定二甲双胍的含量。