发明名称 一种利用重组Corynebacterium crenatum全细胞转化AD生成ADD的方法
摘要 一种利用重组Corynebacterium crenatum全细胞转化AD生成ADD的方法,属于基因工程和酶工程领域。本发明首先获得新金色分枝杆菌中3-甾酮-△<sup>1</sup>-脱氢酶(KSDD)的基因扩增,然后利用pXMJ19质粒,实现了该基因在模式菌株钝齿棒杆菌SYPA5-5中的过量表达,首次成功的纯化出有活性的来源于金色分枝杆菌中的KSDD酶,并首次对其酶学性质进行了研究。本发明构建以4-AD为底物全细胞转化为方法的高产ADD的枯草芽孢杆菌工程菌株,对该菌株的酶活力及发酵性能进行研究发现3-甾酮-△<sup>1</sup>-脱氢酶的活力较出发菌株有了明显提高,以1%(w/v)4-AD为底物,全细胞转化12h,底物摩尔转化率达到83.87%,是出发菌株相对转化率的23倍。
申请公布号 CN104531746A 申请公布日期 2015.04.22
申请号 CN201410748156.8 申请日期 2014.12.09
申请人 江南大学 发明人 饶志明;许正宏;吴丹;邵明龙;张显;徐美娟;杨套伟
分类号 C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P33/02(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N 主分类号 C12N15/77(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种重组表达载体pXMJ19‑ksdD,其特征是:通过PCR技术获得来源于新金色分枝杆菌的KSDD编码基因ksdD,将其与表达载体pXMJ19连接获得。
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