精子酪氨酸磷酸化的检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明提供了一种精子酪氨酸磷酸化的检测试剂盒，包括如下组分：获能缓冲液；荧光结合物；荧光封固液。本发明还提供了用所述的试剂盒进行精子酪氨酸磷酸化检测的方法。本发明相对于现有技术，在方法学的各环节进行了最优化设计，包括获能和上游法的最佳缓冲液配比、专业组织载片提供了稳定的反应场所、特异性结合的精子双标记技术配方，并消除了精液中脱落细胞等非精子物质对检测结果的影响，从而保证了方法学的可靠性，检测结果特异，重复性好；由于采用了优化检测方案，减少了操作步骤和操作时间，大大提高了检测效率；由于采用了优化检测方案，减化了试剂结构，较大程度地降低了检测成本；由于操作简单、采用即用型试剂且性能稳定。

主权项

一种精子酪氨酸磷酸化的检测试剂盒，其特征在于，包括如下组分：1)获能缓冲液，其pH值为7.0～9.0，是以蒸馏水溶解以下物质配制而成，每1000ml获能缓冲液含有：生化缓冲液为N‑(2‑羟乙基)哌嗪‑N‑2‑乙烷磺酸：0.4～24.0g，牛血清蛋白：0.4～20.0g，乳酸钠：0.3～20.0g，葡萄糖:0.1～10.0g，余量为蒸馏水；2)荧光结合物，其pH值为7.0～9.0，是含荧光素标记的酪氨酸磷酸化抗体的量为1～10mg/L的磷酸盐缓冲液；3)荧光封固液,其pH值为7.0～9.0，是以蒸馏水溶解以下物质配制而成，每100ml含有：Na₂HPO₄·12H₂O：0.06～6.00g，KH₂PO₄：0.005～0.500g，NaN₃：0.002～0.200g，对苯二氨0.025～2.500g，甘油：2～45ml，余量为蒸馏水。