猪圆环病毒2型密码子优化的ORF2基因的重组病毒样粒子

摘要

本发明涉及猪圆环病毒（PCV）2型密码子优化的ORF2基因重组杆状病毒病毒样粒子，属于生物制药领域。将所有PCV2 ORF2序列进行比对分析，得到人工合成的密码子优化的PCV2 ORF2序列，命名为YHsfORF2。将YHsfORF2克隆、转染，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF2。密码子优化的ORF2基因能够在重组病毒中高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物免疫保护试验表明该重组病毒灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，有效抑制PCV2在动物体内的复制，对PCV2感染有较好的免疫预防保护作用。

主权项

猪圆环病毒2型密码子优化的ORF2基因的重组病毒，其构建方法如下：1)人工合成猪圆环病毒2型密码子优化的ORF2基因，命名为YHsfORF2基因，所述基因YHsfORF2序列为：SEQ.ID.NO.1；2)将所述基因YHsfORF2连入载体pMD‑18T，获得pMD‑18T‑YHsfORF2；3)用SpeI/XholI双酶切将所述基因YHsfORF2克隆至载体pFastBacHTA中，获得重组质粒命名为pFBHYHsfORF2；4)将pFBHYHsfORF2质粒转化含helper质粒与Bacmid的大肠埃希菌DH10Bac，获得含基因YHsfORF2的重组Bacmid DNA，转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF2。