发明名称 一种应用Triton X-114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法
摘要 本发明公开了一种应用Triton X-114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法,包括以下步骤:在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入1ml Triton X-114,充分混溶得到混合物A,将混合物A冰浴30min;混合物A在37℃条件下水浴放置10min,搅拌;25℃条件下,将搅拌均匀的混合物A在12000g下离心15min,移出上层水相;将用于去除内毒素的尿囊素直接加到上层水相中,得到混合物B,将混合物B在室温下震荡20min;25℃条件下,将震荡后的混合物B在5000g下离心5min,去除底层沉淀,保留上清溶液,上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。本方法具有处理量大、处理周期短、生产成本低、去除内毒素彻底,可将内毒素含量控制在畜禽临床应用标准范围内的优点,并且符合规模化生产的需求。
申请公布号 CN104356211A 申请公布日期 2015.02.18
申请号 CN201410485475.4 申请日期 2014.09.22
申请人 山东信得科技股份有限公司 发明人 李明义;单学强;刘阳;李晓林;张伦;冯晶晶;李佳棋;李朝阳;乔彦良
分类号 C07K14/08(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I 主分类号 C07K14/08(2006.01)I
代理机构 北京康盛知识产权代理有限公司 11331 代理人 张良
主权项 一种应用Triton X‑114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法,其特征在于:包括以下步骤:在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入Triton X‑1141ml,充分混溶得到混合物A,将所述混合物A冰浴30min;将混合物A在37℃条件下水浴放置10min,搅拌;25℃条件下,将搅拌均匀的所述混合物A在12000g下离心15min,移出上层水相;将用于去除内毒素的尿囊素直接加到所述上层水相中,得到混合物B,将所述混合物B在室温下震荡20min;25℃条件下,将震荡后的所述混合物B在5000g下离心5min,去除底层沉淀,保留上清溶液,所述上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。
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