从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法

摘要

本发明公开了一种从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，该方法以高速逆流色谱装置作为分离纯化设备，包括配制构成固定相、流动相的溶剂系统，并以上相为固定相，下相为流动相，将配制好的固定相用气压方式压入并充满主机工作鼓，使其主机转动，然后以预定的流量泵入溶解的叉子圆柏的乙醇提取浸膏和流动相，根据检测谱图，在流动相中分别收集分离得到的鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素组分。本发明提供的液—液分配色谱分离制备方法，完全克服了样品在固体填料上的不可逆吸附、沾污和变性等缺点，操作简便易行，有机溶剂消耗量少，分离效率高，所得产物纯度高达98％以上。

主权项

一种从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将叉子圆柏粉碎成粗粉，以乙醇水溶液进行提取，得到的提取液浓缩后，冷冻干燥得到乙醇提取浸膏；(2)以溶剂A、溶剂B、溶剂C和溶剂D组成高速逆流溶剂系统，将所述高速逆流溶剂系统充分混合后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，取下相为流动相；其中，溶剂A为卤代烷烃或脂肪烷烃；溶剂B为脂肪酸酯；溶剂C为脂肪醇；溶剂D为水或者脂肪酸的水溶液；(3)将步骤(2)得到的固定相用气压方式压入并充满高效逆流色谱仪的主机工作鼓，开启逆流色谱仪，使主机转动，用流量泵泵入步骤(2)得到的流动相，取步骤(1)得到的乙醇提取浸膏溶解于流动相中进样，分别收集鬼臼毒素的洗脱液和脱氧鬼臼毒素的洗脱液，浓缩后得到所述的鬼臼毒素和所述的脱氧鬼臼毒素。