一种肿瘤疫苗及其制备方法

摘要

本发明提供了一种肿瘤疫苗及其制备方法。从人外周血单核细胞中抽提mRNA，在体外合成cDNA，运用聚合酶链反应技术克隆了含有信号肽的粒巨细胞集落刺激因子cDNA，并与仙台病毒载体进行重组，构建了含粒巨细胞集落刺激因子cDNA的重组仙台病毒载体GM-CSF-SV。采用安全性较高的包装细胞293T对含GM-CSF基因的仙台病毒载体GM-CSF-SV进行包装，产生出具有高滴度且不具有复制能力的重组仙台病毒，感染人肺癌细胞株A549，建立了具有GM-CSF表达活性的基因工程人肺癌细胞，采用⁶⁰Co照射灭活瘤苗并进行热休克处理，在摸索了不同的照射剂量后，制备了GM-CSF基因修饰人肺癌细胞瘤苗。

主权项

一种肿瘤疫苗及其制备方法，其特征在于：该肺癌细胞株为A549，用粒巨细胞集落刺激因子基因修饰人肺癌细胞有如下步骤得到：用含粒巨细胞集落刺激因子的重组仙台病毒上清感染A549，得到粒巨细胞集落刺激因子基因修饰人肺癌细胞，应用⁶⁰Co照射使其灭活并进行热休克处理。该粒巨细胞集落刺激因子基因修饰人肺癌细胞瘤苗可以用于治疗肺癌。