一种血液同型半胱氨酸的检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了生物检测技术领域的一种血液同型半胱氨酸的检测方法及试剂盒。此试剂盒包括盒体以及在盒体内的96孔板、HCY标准品、HCY特异性转化酶、还原剂、缓冲液、显色液A和显色液B，此试剂盒利用rHCYase分解血中的HCY产生H2S，生产的H2S与二甲基对苯胺反应生产甲基蓝，通过甲基蓝生成量反应血液中HCY的含量。本试剂盒操作简单，试剂稳定性好，重复性高，方法灵敏，适用于实验室和临床快速检测HCY。

主权项

一种血液同型半胱氨酸的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）准备工作：将HCY标准品用缓冲液溶解分别配置浓度为50μmol/L、25μmol/L、10μmol/L、5μmol/L、2.5μmol/L、0 μmol/L的HCY溶液，临用前15分钟内配制；将还原剂用缓冲液溶解配制成浓度为1μmol/L还原剂工作液；将HCY特异性转化酶用缓冲液配制成浓度为0.4‑0.6mg/ml的HCY特异性转化酶工作液；（2）检测：在96孔板中分别加入HCY 标准品和样品，加入还原剂工作液还原1h；加入HCY特异性转化酶工作液反应5min；加入显色液A, 反应5min；加入显色液B, 反应10min；（3）标准曲线制备：根据标准品浓度溶液在670nm的吸光度值制备标准曲线，然后计算样品中HCY含量；或根据标准品浓度溶液在激发波长615nm，发射波长685nm的荧光强度制备标准曲线，计算样品中HCY含量。