发明名称 一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法
摘要 本发明涉及一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法。本发明通过设计引物,构建重组表达载体pET-32a(+)-p10,诱导表达得到大量重组目的蛋白,然后将蛋白放于4℃,使其产生自然沉降,离心后将沉淀洗涤并溶解从而得到大量较纯的重组目的蛋白。本发明克服了现有纯化方法中的很多繁琐的步骤,利用沉淀、溶解、差速离心的方法去掉大部分杂蛋白,减少了对目的蛋白的损伤及损耗,能够利用简单的步骤得到大量较纯的目的蛋白,既简单又节省了大量的人力、物力、财力。
申请公布号 CN102851308A 申请公布日期 2013.01.02
申请号 CN201210276843.5 申请日期 2012.08.06
申请人 天津耀宇生物技术有限公司 发明人 张耀洲;张小蓓;杨波;陈剑清;舒特俊
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12R1/94(2006.01)N 主分类号 C12N15/70(2006.01)I
代理机构 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 代理人 张艳赞
主权项 一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)以家蚕多角体病毒基因组为模板进行p10基因的扩增;(b)分别双酶切p10基因和载体,连接构建重组表达载体,转化表达菌,构建p10基因工程菌;(c)培养p10基因工程菌,诱导表达重组目的蛋白;(d)纯化所得重组目的蛋白。
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