一种水霉菌孢子检测试剂及检测方法

摘要

本发明涉及菌类检测技术，提供的水霉菌检测试剂包括以下组分：(1)检测反应液：20mmol/L Tri-HCl；10mmol/L(NH4)2SO4；10mmol/L KCL；0.1％Triton X-100；MgSO4 10mmol/L；dNTPs1mmol/L；Betaine0.6mmol/L；内引物FIP和内引物BIP1.5μmol/L、外引物F3和外引物B30.8μmol/L；8U BstDNA聚合酶大片段；(2)反应显色液：10％SYBR Green荧光染料/TAE缓冲液；(3)核酸裂解液，包括：核酸裂解溶液A：100mmol/L Tris HCl，pH9.0、40mmol/L EDTA，pH8.0；核酸裂解溶液B：10％SDS；核酸裂解溶液C：100％氯化苄。本发明方法简单、费用低、操作简便，检疫人员可在鱼塘附近进行现场采样操作。

主权项

一种水霉菌检测试剂，包括以下组分：(1)检测反应液：20mmol/L Tri‑HCl10mmol/L(NH4)2SO410mmol/L KCL0.1％Triton X‑100MgSO410mmol/L；dNTPs1mmol/L；Betaine0.6mmol/L；内引物FIP和内引物BIP1.5μmol/L；外引物F3和外引物B30.8μmol/L；8U Bst DNA聚合酶大片段。其中内引物FIP和BIP，外引物F3和B3分别是SP‑FIP：GTTGTATTTCAATTGCATGCAGACATGAATCCTTTTTAAACTACGACTGSP‑BIP：TTCAACAGTGGATGTCTAGGCTCACTGAATTCTGCAATTCGCSP‑F3：GCAAGAAGCCGATGTCAATSP‑B3：GCGTTCAAAATTTTGATGACT。(2)反应显色液：10％SYBR Green荧光染料/TAE缓冲液；(3)核酸裂解液，包括：核酸裂解溶液A；100mmol/L Tris HCl，pH9.0、40mmol/L EDTA，pH8.0；核酸裂解溶液B：10％SDS；核酸裂解溶液C：氯化苄。