一种生产体细胞克隆牛囊胚的方法

摘要

本发明公开了一种生产体细胞克隆牛囊胚的方法。该方法以牛耳缘成纤维细胞为核移植供体细胞，以体外培养成熟的牛卵母细胞为核移植受体细胞，将卵母细胞挤压去核并去除透明带后，与供体细胞以卵母细胞-供体细胞-卵母细胞的排列方式黏附并进行电融合得重构胚胎，重构胚胎激活后进行体外培养得克隆囊胚。该方法可提高克隆牛囊胚的生产效率。

主权项

一种生产体细胞克隆牛囊胚的方法，包括以下步骤：(1)以牛耳缘成纤维细胞为核移植供体细胞；(2)将牛卵母细胞进行体外成熟培养，将体外培养成熟并排出第一极体的卵母细胞作为核移植受体细胞；(3)将步骤(2)所得卵母细胞挤压去核并去除透明带；(4)先将一枚步骤(3)所得卵母细胞与一枚供体细胞用PHA法黏附形成复合体，施以交流电，再将另一枚步骤(3)所得卵母细胞黏附在上述复合体上，使其排列顺序为卵母细胞‑供体细胞‑卵母细胞；最后施以直流电对其进行融合，构建重构胚胎；(5)所述重构胚胎激活后，进行体外培养得克隆囊胚。