一种将多个基因同时导入微生物基因组的方法

摘要

本发明公开了一种将多个基因同时导入微生物基因组的方法。本发明提供了制备表达多个外源基因的重组微生物的方法，包括如下步骤：将各个基因的表达盒一起导入宿主微生物，得到将多个外源基因整合入基因组并表达所述多个外源基因的重组微生物；第一个基因的表达盒的5’端具有同源臂甲，最后一个基因的表达盒的3’端具有同源臂乙，每个基因的表达盒的3’末端和下一个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；所述同源臂甲和所述同源臂乙可与所述宿主微生物的基因组发生同源重组。通过该方法，可以将目标代谢途径所含多个基因一步导入宿主菌株中，并按所设定的顺序排列，直接获得所需要的工程菌株，避免多次转化及载体构建所带来的麻烦。

主权项

一种制备表达多个外源基因的重组微生物的方法，包括如下步骤：将各个基因的表达盒一起导入宿主微生物，得到将所述多个外源基因整合入基因组并表达所述多个外源基因的重组微生物；当所述多个外源基因为两个外源基因时，第一个基因的表达盒的5’末端具有同源臂甲，第二个基因的表达盒的3’末端具有同源臂乙，第一个基因的表达盒的3’末端与第二个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；当所述多个外源基因为三个外源基因时，第一个基因的表达盒的5’末端具有所述同源臂甲，第三个基因的表达盒的3’末端具有所述同源臂乙，第二个基因的表达盒的5’末端与第一个基因的表达盒的3’末端具有相同的同源臂，第二个基因的表达盒的3’末端与第三个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；当所述多个外源基因为四个以上外源基因时，第一个基因的表达盒的5’末端具有所述同源臂甲，最后一个基因的表达盒的3’末端具有所述同源臂乙，每个基因的表达盒的3’末端和下一个基因的表达盒的5’末端具有相同的同源臂；所述同源臂甲和所述同源臂乙可以与所述宿主微生物的基因组发生同源重组。