用大麦麦芽蛋白制备抗菌蛋白的方法

摘要

本发明利用硫酸溶液提取大麦、经5天发芽的绿麦芽蛋白液，离心取上清，用碱调到中性后，采用硫酸铵分级沉淀，用精密排阻的透析袋透析至无硫酸根离子，加乙腈使乙腈与抗菌蛋白达到一定比例，离心去除沉淀，上清液用0.45μm纤维滤膜除菌后，即可得抗菌蛋白液。抗菌蛋白含量达到31μg/ml时，把抗菌蛋白加到酵母培养液里面，培养8h后，抑制率为30％；加到乳酸菌培养液中，培养8h后，抑制率达到50％。本发明提取抗菌蛋白操作简便易行。

主权项

一种用大麦麦芽蛋白制备抗菌蛋白的方法，其特征在于具体操作步骤如下：第一步、将大麦麦芽粉碎后，将麦芽粉末与0.05M硫酸以1∶3～7混合，冰浴提取2～4小时，每隔10～15分钟搅拌一次，8000r/min离心10分钟，取上清液，用氢氧化钠调到6.5～7.0，得到抗菌蛋白的粗提液；第二步、将抗菌蛋白的粗提液加入硫酸铵至饱和度达到30％，在4℃，10000r/min，离心10min后，去沉淀，上清液加入80％硫酸铵，在4℃，10000r/min离心10分钟后弃去上清液，将沉淀用水复溶；第三步、将上述复溶物加到精密排阻1000Da的透析袋中，透析至所得蛋白液用氯化钡检测无硫酸根离子，将上述蛋白液离心得上清液，冷冻干燥，加入乙腈水溶液复溶，离心弃除不容物，用0.45微米纤维滤膜过滤后即得抗菌蛋白液，其中乙腈水溶液为乙腈∶水＝1∶3～5。