孕前开始的维生素A缺乏母鼠及其仔鼠动物模型的构建方法

摘要

本发明公开孕前开始的维生素A缺乏母鼠及其仔鼠动物模型的构建方法，其步骤如下：第一步，配制基础饲料；其成分的重量百分比为，动物蛋白质20％、植物脂肪5％、葡萄糖68.005％、无机盐组合物6.750％、维生素组合物0.245％；按照上述配方混匀后，加入视黄醇200-400IU/kg并充分混匀，再加入蒸馏水制成块状，室温干燥，-20℃保存，作为维生素A缺乏母鼠实验组的饲料；第二步，选择实验动物；第三步，构建维生素A缺乏母鼠模型；第四步，构建维生素A缺乏仔鼠模型；本发明构建模型流程简单，成功率高，便于推广应用；为维生素A缺乏机理的研究、寻找最佳补充干预时间及维生素A强化食品的开发和鉴定提供了技术平台。

主权项

孕前开始的维生素A缺乏母鼠及其仔鼠动物模型的构建方法，其步骤如下：第一步，配制基础饲料；基础饲料成分的重量百分比为，动物蛋白质20％、植物脂肪5％、葡萄糖68.005％、无机盐组合物6.750％、维生素组合物0.245％；配制基础饲料所用的动物蛋白为鸡蛋蛋白；配制基础饲料所用的植物脂肪为一级大豆油；配制基础饲料所用的无机盐组合物为碳酸钠18.000g/kg、三水磷酸氢二钾25.550g/kg、二水磷酸氢钙4.550g/kg、氯化钙10.080g/kg、七水硫酸铁1.500g/kg、七水硫酸镁7.500g/kg、碘化钾0.015g/kg、七水硫酸锌0.252g/kg、五水硫酸铜0.018g/kg、一水硫酸锰0.138g/kg；配制基础饲料所用的维生素组合物为维生素B1 5.0mg/kg、维生素B2 5.0mg/kg、维生素B6 5.0mg/kg、维生素B12 0.2mg/kg、生物素0.5mg/kg、叶酸0.5mg/kg、烟酸50.0mg/kg、泛酸钙50.0mg/kg、肌醇100.0mg/kg、氯化胆碱1000.0mg/kg、维生素D2176.0mg/kg、维生素K1 0.6mg/kg、维生素E 45.5mg/kg；按照上述配方混匀后，再加入视黄醇200‑400IU/kg，与其它成分充分混匀，加入蒸馏水制成块状，室温干燥，‑20℃保存，作为维生素A缺乏母鼠实验组的饲料；按照上述配方混匀后，再加入视黄醇6500IU/kg，与其它成分充分混匀，加入蒸馏水制成块状，室温干燥，‑20℃保存，作为维生素A正常母鼠对照组及健康雄性大鼠的饲料；第二步，选择实验动物；选择10‑12周龄，体重230‑250g的清洁级健康的Wistar大鼠，雌性20只，雄性10只，随机分成实验组和对照组。第三步，构建维生素A缺乏母鼠模型；实验组的雌性大鼠给予维生素A缺乏饲料喂养，在喂养过程中以25g/天/只的进食量均衡喂养，以维生素A缺乏饲料喂养雌性大鼠21天后，尾静脉采血检测血清中视黄醇浓度低于0.7μmol/L时，维生素A缺乏母鼠模型构建成功；第四步，构建维生素A缺乏仔鼠模型；将第三步得到的维生素A缺乏母鼠2只与一只健康的雄性大鼠按照2∶1雌雄合笼，使维生素A缺乏母鼠怀孕并产仔，母鼠产仔量一般为6‑14只；在怀孕及哺乳期间，均以维生素A缺乏饲料喂养孕鼠和母鼠，直至21天断奶，获得从孕期开始的维生素A缺乏的仔鼠。