连续酶解与超滤分离偶联制备麦胚蛋白ACE抑制肽的方法

摘要

连续酶解与超滤分离偶联法制备小麦胚芽蛋白血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的方法，该方法按照下述步骤进行：将脱脂小麦胚芽粉进行粉碎，用中温淀粉酶法提取麦胚蛋白；对麦胚蛋白溶液进行均质后采用蛋白连续酶解与超滤分离偶联的技术进行麦胚降血压肽的制备与分离，最后通过浓缩与干燥得到粉状的麦胚降血压肽产品。该方法可以使产物不断在线分离避免其过度酶解，同时酶得到循环利用，提高了单位酶的利用率；此外，避免了间歇操作中的灭酶操作，实现了制备麦胚蛋白ACE抑制肽工艺的连续性。通过该方法制备得到麦胚蛋白ACE抑制肽可用于制备具有抑制体内血管紧张转换酶ACE的活性的药物或保健食品。

主权项

连续酶解与超滤分离偶联法制备小麦胚芽蛋白血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的方法，其特征在于按照下述步骤进行：将脱脂小麦胚芽粉按照8％‑12％的浓度溶于水，在pH值8‑9.5下搅拌0.5h‑1h，离心获得上清液，调节pH值到6.0‑7.5，采用中温淀粉酶在60℃‑70℃下酶解120‑240min，加酶量以质量与体积比计为1％‑2.5％；酶法降解淀粉后，调节pH到4‑4.5，得到沉淀，用水溶解稀释，调节pH值至中性，喷雾干燥或冷冻干燥得到提取的小麦胚芽蛋白；将提取的小麦胚芽蛋白配置成底物浓度为1％‑3％的溶液，用均质机进行均质；随后进行酶膜耦合水解，采用碱性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或中性蛋白酶，加酶量为麦胚蛋白重量的2％‑8％，pH为6‑9，温度37℃‑50℃；酶解反应液送入到超滤装置，产物溶液透过超滤膜，没有反应的底物和酶溶液继续回到反应器中反应，超滤膜的截留分子量为1‑5kDa，超滤压力维持在0.3‑1.5kg/cm2，出肽速率为5‑12ml/min；同时根据透过产物的量，补充麦胚溶液进入反应釜，根据反应釜中pH的变化，通过自动装置动态进行pH的调节，维持在所需的pH值附近；透过液用真空浓缩装置浓缩至固形物含量30％左右，用喷雾干燥进行干燥，得到粉状的麦胚ACE抑制肽产品。