发明名称 根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法
摘要 本发明涉及植物转基因技术,尤其涉及一种基于根癌农杆菌介导的花生转基因方法。本发明的根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法,包括如下步骤:(1)使用常规方法将已构建好的携带目的基因的Ti质粒载体转入根癌农杆菌;(2)转化菌体在YEP培养基中振荡培养;(3)取取2-6μl重悬的菌液,在花生生长的适宜期注入花生植株,使农杆菌在花生植株内侵染、转化;(4)收获种子后,取花生子叶组织薄片,快速提取待测样品DNA作为PCR模板;(5)使用依据目的基因序列设计的特异性引物进行PCR鉴定,电泳检测结果。本发明通过根癌农杆菌介导的转基因技术,可方便快速获得可育后代,无需单独的组培再生阶段。
申请公布号 CN102199621A 申请公布日期 2011.09.28
申请号 CN201110058531.2 申请日期 2011.03.11
申请人 山东省花生研究所 发明人 王传堂;王秀贞;李贵杰;于洪涛;唐月异;杨伟强;张建成;崔凤高;禹山林
分类号 C12N15/84(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I 主分类号 C12N15/84(2006.01)I
代理机构 青岛发思特专利商标代理有限公司 37212 代理人 巩同海
主权项 一种根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)使用常规方法将已构建好的携带目的基因的Ti质粒载体转入根癌农杆菌;(2)转化菌体在YEP培养基中振荡培养;(3)取取2‑6μl重悬的菌液,在花生生长的适宜期注入花生植株,使农杆菌在花生植株内侵染、转化;(4)收获种子后,取花生子叶组织薄片,快速提取待测样品DNA作为PCR模板;(5)使用依据目的基因序列设计的特异性引物进行PCR鉴定,电泳检测结果。
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