红蓝石蒜的组织培养和快速繁殖技术的方法

摘要

本发明公开了一种红蓝石蒜的组织培养和快速繁殖技术的方法，步骤如下：1)、培养基的配制；包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：基本培养基：MS或1/2MS，其中蔗糖20～40g/L，琼脂8g/L，pH5.8；诱导培养基：MS+TDZ0.2～1.0mg/L+活性炭2g/L；增殖培养基：MS+6-BA3～7mg/L+NAA0.5～2.5mg/L；壮苗培养基：MS+6-BA0.5～2.5mg/L+NAA0.5～1.0mg/L；生根培养基：1/2MS+KT0.5～2.5mg/L+IBA0.5～2.5mg/L+活性炭2g/L；2)、外植体的选取与灭菌处理：3)、诱导培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养：4)、组培苗的驯化与移栽。本发明的有益效果是：红蓝石蒜小芽的诱导率达90％以上；每个周期的增殖率在500％以上；红蓝石蒜小芽生长速度加快；有效地防止了外植体褐变现象，在防止小鳞茎褐变的同时还促进了组培苗的生根。

主权项

一种红蓝石蒜的组织培养和快速繁殖技术的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：(1)基本培养基：MS或1/2MS，其中蔗糖20～40g/L，琼脂8g/L，pH5.8；(2)诱导培养基：MS+TDZ0.2～1.0mg/L+活性炭2g/L；(3)增殖培养基：MS+6‑BA3～7mg/L+NAA0.5～2.5mg/L；(4)壮苗培养基：MS+6‑BA0.5～2.5mg/L+NAA0.5～1.0mg/L；(5)生根培养基：1/2MS+KT0.5～2.5mg/L+IBA0.5～2.5mg/L+活性炭2g/L；2)、外植体的选取与灭菌处理：选用生长健壮的红蓝石蒜鳞茎进行灭菌处理，外植体取样放在4～5月份，石蒜花葶抽出前2个月；灭菌处理后将鳞茎切留距鳞茎基盘0.8～1.3厘米的高度，每个鳞茎平均对切为4块，后将每片分内外两层切开，每块有3～5层鳞片；3)、诱导培养：将灭菌处理后的外植体放在灭菌过的滤纸上吸干水分，接入诱导培养基上进行诱导培养，外植体诱导培养3天后鳞片膨胀卷曲，12～15天后鳞片间可见有米粒状突起；4)、增殖培养：诱导培养15天后，将生长于诱导培养基上外植体转接于增殖培养上进行增殖培养；培养15～20天后分化出丛芽；每隔15～20天，将分化的丛芽切成单株再接种在增殖培养基上，再分化丛芽；5)、壮苗培养：将分化出的丛芽切成单株接种到壮苗培养基上，15～20天后小芽基部膨大成小鳞茎，直径为0.3～0.8厘米；6)、生根培养：将壮苗培养后的小鳞茎接种到生根培养基上，10～15天小鳞茎基部生出2～7根根系；7)、组培苗的驯化与移栽：当生根培养20天时，将生根小鳞茎移至常温下适应3～5天，打开培养瓶盖再适应3～5天，洗净根部培养基后移栽到装有细纱∶泥炭∶珍珠岩的体积比为2∶1∶1基质的穴盘中，浇透水。