一种重组葡激酶衍生体及其制备方法

摘要

本发明公开了属于基因工程及生物溶栓药物制备技术范围的涉及一种重组葡激酶衍生体及其制备方法。其制备方法为利用基因体外重组技术将RGD序列、水蛭素的C末端序列与构建的低抗原性高活性SAK突变体基因相融合，同时引入Xa因子切割位点和柔性连接臂，将其C末端氨基酸进行修饰，另外添加一个赖氨酸。利用双酶切和PCR对构建的突变体碱性鉴定，构建了融合蛋白表达载体，使融合蛋白可以在血块周围被降解成具有不同功能的多肽。获得高效表达的重组SAK衍生体；为研制新一代溶栓药物奠定了基础，同时将大大拓展新型SAK衍生体的应用范围。

主权项

一种重组葡激酶衍生体，其特征在于，所述重组葡激酶衍生体核酸序列表如下：所述重组葡激酶衍生体的核苷酸序列AAA GGC GAT GAC GCG AGT TAT TTT GAA CCA ACA GGC CCG TAT TTG ATG GTA AAT GTGACT GGA GTT GAT GGT AAA GGA AAT GAA TTG CTA TCC CCT CGT TAT GTC GAG TTT CCTATT AAA CCT GGG ACT ACA CTT ACA AAA GAA AAA ATT GAA TAC TAT GTC GAA TGG GCATTA GAT GCG ACA GCA TAT CAA GAG TTT AGA GTA GTT GAA TTA GAT CCA AGC GCA AAGATC GAA GTC ACT TAT TAT GAT AAG AAT AAG AAA AAA GAA GAA ACG AAG TCT TTC CCTATA ACA GAA AAA GGT TTT GTT GTC CCA GAT TTA TCA GAG CAT ATT AAA AAC CCT GGATTC AAC TTA ATT ACA GCG GTT GTT ATA GAA CGT GCG AAA ATT GAA GGT CGT CGT GGTGAT GGT GGT GGT GGT TCT GGT GAT TTT GAA GAA ATT CCA GAA GAA TAT CTG CAA；所述重组葡激酶衍生体对应的氨基酸序列Lys Gly Asp Asp Ala Ser Tyr Phe Glu Pro Thr Gly Pro Tyr Leu Met Val Asn ValThr Gly Val Asp Gly Lys Gly Asn Glu Leu Leu Ser Pro Arg Tyr Val Glu Phe ProIle Lys Pro Gly Thr Thr Leu Thr Lys Glu Lys Ile Glu Tyr Tyr Val Glu Trp AlaLeu Asp Ala Thr Ala Tyr Gln Glu Phe Arg Val Val Glu Leu Asp Pro Ser Ala LysIle Glu Val Thr Tyr Tyr Asp Lys Asn Lys Lys Lys Glu Glu Thr Lys Ser Phe ProIle Thr Glu Lys Gly Phe Val Val Pro Asp Leu Ser Glu His Ile Lys Asn Pro GlyPhe Asn Leu Ile Thr Ala Val Val Ile Glu Arg Ala Lys Ile Glu Gly Arg Arg GlyAsp Gly Gly Gly Gly Ser Gly Asp Phe Glu Glu Ile Pro Glu Glu Tyr Leu Gln。