用于产生感染性流感病毒的DNA转染系统

摘要

本发明基于有效细胞内合成病毒RNA的双启动子系统(优选RNA polI-pol II系统)的开发。所得基于最少质粒的系统可以用于合成任何RNA病毒，优选含负单链RNA基因组的病毒。当该系统的质粒导入合适的宿主细胞时产生该系统的病毒产物。该系统的一个应用是制备减毒的重配流感病毒用作疫苗中的抗原。质粒共转染产生的重配病毒可以包含编码来自当前感染人群的流感病毒的表面糖蛋白血凝素和神经氨酸酶的基因和来自减毒流感病毒的内部基因。本发明的优越性能是其多用途；可快速和简单调整该系统来合成任何RNA病毒的减毒型。本发明产生的减毒或灭活RNA病毒可以通过包括鼻内或肌肉内的几种途径中的任何一种给予需要疫苗接种的患者。

主权项

1.用于从克隆的病毒cDNA生产感染性负链RNA病毒的基于最少质粒的系统，含有一组质粒，每个质粒能够表达vRNA和病毒mRNA，其中每个质粒含有对应于病毒基因组节段的病毒cDNA，该病毒cDNA被插在能够指导vRNA合成的、包含RNA聚合酶I启动子和调控元件的内部转录单位中，该内部转录单位又插入到能够指导mRNA合成的、包含RNA聚合酶II启动子和多腺苷酸化信号的外部转录单位中。