一种具有生物活性的人工角膜的制备方法

摘要

一种具有生物活性的人工角膜的制备方法，本发明以动物角膜基质为材料，采用酶消化、反复冻融、洗涤、⁶⁰Co辐照、复合促进角膜细胞生长或/和阻止局部病变发展的功能组分的步骤制备。使用物理和化学方法去除易引起免疫反应的细胞成分和可溶性蛋白，保留了角膜部分细胞外基质结构、并添加利于角膜细胞生长的或/和阻止局部病变发展的多种功能成分后冻干保存。制备的人工角膜具有与正常角膜相似的拉伸强度、屈光度，植入患处后可阻止病变发展及角膜溶解，促进角膜上皮再生及基质胶原合成，减少新生血管生成；同时具有良好的生物相容性，无明显的免疫排斥反应，对细胞无毒性，可治疗各种眼损伤。

主权项

1、一种具有生物活性的人工角膜的制备方法，包括有动物角膜的预处理步骤，复合促进角膜细胞生长或/和阻止局部病变发展的功能组分的步骤，其特征在于，具体操作按以下步骤：(1)酶消化：将预处理后的动物角膜置于1000～8000U/ml蛋白酶溶液中消化30分钟～12小时，再用蒸馏水漂洗角膜，蒸馏水浸泡角膜，使其充分溶胀；(2)反复冻融：将溶胀后的角膜置于液氮中至少30分钟，取出角膜后置于室温下自然解冻，如此反复冻融2～5次，用蒸馏水漂洗角膜；(3)洗涤：将漂洗后的角膜置于含表面活性剂的溶液中溶解细胞，震荡洗涤6～12小时，用蒸馏水漂洗角膜；(4)60Co辐照：将洗涤后的角膜冻干，将冻干后的角膜使用60Co辐射，辐照总剂量为5～20kGY。