H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用

摘要

H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用，属于生物技术领域，特别涉及H5亚型禽流感病毒的检测技术领域。由反应液A和反应液B组成，将2μl待检RNA溶液加入装有反应液A的反应管中，放置于60～65℃恒温水浴箱中，经90min后在上述反应管中再加入1μl反应液B，用肉眼观察颜色变化，如颜色变为绿色，则样品为H5亚型禽流感病毒；如果颜色为黄色，则待检样品不是H5亚型禽流感病毒。本试剂盒可提供简便、快速的H5亚型禽流感病毒检测。

主权项

1.H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒，其特征在于包括：(1)反应液A：含有10倍等温反应缓冲液、浓度为8U/μl的禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶、浓度为40U/μl的核酸酶抑制剂、浓度为8U/μl的Bst DNA聚合酶、浓度为10mM的dNTP、浓度为100mM的硫酸镁、浓度为20μM的内引物1、浓度为20μM的内引物2、浓度为10μM的外引物1、浓度为10μM的外引物2和浓度为5M的甜菜碱；其中：10倍等温反应缓冲液含有浓度为200mM、pH值为8.8的三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐、浓度为100mM的氯化钾、浓度为100mM的硫酸铵、浓度为20mM的硫酸镁和浓度为1％的曲拉通X-100；内引物1为：TCTTTGTCTGCAGCGTAYCCTTTTGGGAATGGTAGATGGTTGG内引物2为：ATGGAGTCACCAATAAGGTCAACTTTTTCTAAGTTRTTAAATTCCCTTCCAAC外引物1为：TATAGAGGGRGGATGGCA外引物2为：CCGTCTTCCATYTTYTTGTT(2)反应液B：1000倍荧光染料。