2型猪链球菌毒力基因PCR扩增检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种2型猪链球菌(Streptococcus suis Serotype 2，SS2)毒力基因PCR扩增检测试剂盒，包括SS2DNA对照模板、PCR扩增检测试剂、琼脂糖凝胶电泳试剂以及DNA梯度标准品；本发明1次性测定SS27个重要基因，根据是否扩增出链球菌属特异性基因、SS2种特异性基因及5个重要的SS2毒力相关基因，可对是否为链球属感染、有否SS2感染作出鉴别诊断，且对SS2感染菌的毒力、侵袭力倾向及疾病的预后作出快速、早期预测，有利于临床疑似病例的早期诊断和鉴别诊断，并有助于疾病流行及危害程度的早期预警，有望用于人感染SS2应急检测、疾病监测、流行病学调查和临床早期快速实验室诊断。

主权项

1.一种2型猪链球菌(Streptococcus suis Serotype 2，SS2)毒力基因PCR扩增检测试剂盒，包括SS2 DNA对照模板、PCR扩增检测试剂、琼脂糖凝胶电泳试剂以及DNA梯度标准品，所述PCR扩增检测试剂主要包括PCR缓冲液、特异性扩增引物、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶和灭菌纯水；其特征在于：所述特异性扩增引物为：16S-195(s)：5’-CAG TAT TTA CCG CAT GGT AGA TAT-3’16S-489(as2)：5’-GTA AGA TAC CGT CAA GTG AGA A-3’cps2J-s：5’-GTT GAG TCC TTA TAC ACC TGT T-3’cps2J-as：5’-CAG AAA ATT CAT ATT GTC CAC C-3’mrp-Fw：5’-GGT ATA CCT TGC TGG TAC CGT TC-3’mrp-Re：5’-AGT CTC TAC AGC TGT AGC TGG-3’sly-Fw：5’-AGT TCG CAC TTG ATT TTA AG-3’sly-Re：5’-AAT ACA TTG CCA GAT TAC TC-3’gapdh-Fw：5’-GGC GCC GAA TTC GTC GAC ATT ATT TAG CAA TTT TTG CG-3’gapdh-Re：5’-CGC CGC GGA TCC GTA GTT AAA GTT GGT ATT AAC-3’ef-Fw：5’-ACA AAG GCG TAG GTT CAA TC-3’ef-Re：5’-CGG CAT CAA GAA TGT CTT TG-3’tuf-Fw：5’-GTA CAG TTG CTT CAG GAC GTA TC-3’tuf-Re：5’-ACG TTC GAT TTC ATC ACG TTG-3’CI6-s：5’-GTT GAG TCC TTA TAC ACC TGT TAC TCA GTG CCG CAG CTA ACG CAT T-3’CI7-as：5’-CAG AAA ATT CAT ATT GTC CAC CCG ACT TCA CCC CAA TCA TCT ATC C-3’。