蛋白酶检测系统

摘要

本发明公开了细胞内蛋白酶检测系统。在一个实施方案中，该系统包括嵌合蛋白质，其包括共价连接成分：1)至少一种可选地掩蔽信号蛋白质；2)至少一种蛋白酶特异的切割位点；和3)至少一种可检测的氨基酸序列。本发明有广谱的应用，包括用于细胞和组织内新蛋白酶抑制剂的检测。

主权项

1.嵌合蛋白质，其包含至少一种有靶向到亚细胞器的运输信号的信号蛋白质和至少一种蛋白酶的蛋白酶剪切位点，将其构建为：(a)通过连接蛋白水解位点或通过蛋白水解位点连接信号掩蔽蛋白质至信号蛋白质的N或C末端，失活所有信号蛋白质的运输信号，因此嵌合蛋白质存在于胞质溶胶中；(b)当蛋白酶剪切位点被蛋白酶切割时，至少一种信号蛋白质的运输信号被活化，并导致至少一种包含活化信号蛋白质的片段蛋白质被转运到亚细胞器；和(c)用至少一种荧光蛋白质标记嵌合蛋白质，荧光标记信号在细胞中的位置和强度分布根据蛋白酶的切割而改变。