固态发酵生产蜡状芽孢杆菌微生态制剂的方法

摘要

本发明涉及一种固态发酵生产蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus DM423)微生态制剂的方法,其特征在于以麸皮和豆饼粉为主要培养料,经灭菌、液体种子接种、周期变压固态发酵和真空冷凝干燥的工艺过程,发酵产品的活孢子数达到500亿个/克以上,比传统的固态发酵法提高2倍以上,且生产成本低,为现有生产技术(液体深层发酵法)的1/3,生产过程无三废产生。

主权项

1.一种固态发酵生产腊状芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于：工艺步骤如下：1)制备腊状芽孢杆菌Bacillus cereus DM423种子液：将琼酯斜面上生长良好的腊状芽孢杆菌Bacillus cereus DM423，加入无菌水，制成菌悬液，接种子种子培养液中，在28—30℃温度下，发酵8-10小时，制备腊状芽孢杆菌Bacillus cereus DM423种子液；所述的种子培养液的组成包括玉米面、豆饼粉和玉米浆和水，其重量份配比为∶玉米面∶豆饼粉∶玉米浆∶水＝1.5—2.5∶0.8—1.2∶0.5—1.5∶100；用氢氧化钠溶液将pH值调至6.7—7.0；2)制备发酵用固体培养基：发酵用固体培养基由固体料和水组成，固体料和水的重量份配比为1∶0.8—1，固体料包括麸皮、豆饼粉、生石灰，其重量份配比为：麸皮∶豆饼粉∶生石灰＝7--9∶1--2.5∶0.1—0.25，生石灰的加入量视生石灰质量而定，其加入量以使固体料在进行蒸料灭菌后的pH值保持在6.7—7.0为宜；将配制好的发酵用固体培养基进行灭菌，之后，冷却至25--32℃；3)将步骤1制备的腊状芽孢杆菌Bacillus cereus DM423种子液，以相当于发酵用固体培养基重量的7—10％的接种量接种于发酵用固体培养基，在密闭式固态发酵反应器中进行发酵，发酵反应器中压力控制在0.05Mpa—0.25Mpa的范围内，并以30分钟—2小时为周期对发酵过程进行周期变压操作，所谓的周期变压操作是指周期性的重复充压、高压维持、泻压和低压维持这一过程，同时，控制发酵温度28--30℃，发酵时间40—48小时，制得发酵产物；4)将发酵产物进行真空冷凝干燥、然后粉碎，即制得含水量为1-4％的固态发酵生产腊状芽孢杆菌微生态制剂。