| 摘要 |
<p>La présente invention se rapporte à un système d'encapsidation améliorée et simplifiée d'amplicons de virus herpétique ainsi qu'à des procédés de production de vecteurs du virus herpétique recombinés par mise en oeuvre de la technique de 'sauvegarde du pac'. Dans une réalisation de ce système d'encapsidation, le génome du HSV-1 est cloné et conservé comme un chromosome artificiel bactérien (BAC) à base de plasmides du facteur F à copie-unique dans E.coli. Un tel plasmide, qui contient le génome de HSV-1 modifié par une délétion visant à supprimer les signaux pac, n'a pas généré de virus de descendance apte à la réplication lors de la transfection dans des cellules mammaliennes, mais il a permis l'encapsidation d'ADN d'amplicon co-transfecté qui contenait un signal pac fonctionnel. Dans une autre réalisation, le génome de HSV cloné dans le BAC possède un signal pac intact, cependant, le génome du HSV assistant est rendu inapte à l'encapsidation, par accroissement ou réduction de la taille du BAC. Cette méthode implique la co-introduction, dans des cellules permissives, de fragments d'ADN contenant un site pac flanqué par des séquences de HSV homologues et du génome du virus assistant à délétion du pac. Dans une autre réalisation de l'invention, toute sorte de modification peut être introduite dans le génome viral par recombinaison homologue de bactéries.</p> |
