制备单克隆抗体的方法、单克隆抗体、药物组合物和诊断试剂

摘要

本发明涉及制备抗细胞和病毒表面抗原单克隆抗体的有效方法。本方法提供仅以相对小量存在的抗原,或仅可得到很小量的抗原或容易丧失其体内构象的抗原。因此,根据本发明的方法包括一系列步骤,包括相对于特异性B－细胞的相对数目其中的来自注射以包括表面抗原物质的哺乳动物的B－细胞被富集的步骤和包括小规模融合技术的步骤。

主权项

1.制备抗细胞表面抗原单克隆抗体的方法，包括以下步骤1)以包括细胞表面抗原的物质注射哺乳动物，所述的物质选自i)整个细胞和ii)通过处理整个细胞而获得的膜部分；2)从所述哺乳动物的脾脏中分离含B-细胞的细胞部分；3)在对所述细胞表面抗原特异性的B-细胞中通过以下步骤富集步骤2中获得的所述细胞部分，包括：将该细胞部分与和所述整个细胞有关的细胞的结合载体物质接触，该细胞结合载体相关物质缺乏所述的细胞表面抗原，和从待用于下一步骤的富集的未结合含B-细胞的细胞部分中分离结合到相关细胞结合载体物质上的B-细胞；4)将富集的在前面步骤获得的含B-细胞的细胞部分进行有限的稀释接着进行克隆扩增；5)筛选B-细胞克隆并用小规模融合技术使所述筛选出的B-细胞克隆无限繁殖；和6)筛选和克隆能产生特异性结合所述细胞表面抗原抗体的杂交瘤，接着从所述杂交瘤的上清液中分离包括单克隆抗体的部分。