发明名称 一种紫香兰组培快繁方法
摘要 本发明公开了一种紫香兰组培快繁方法,其特征在于,主要步骤包括:人工授粉、无菌播种、原球茎继代增殖、原球茎分化、组培苗生根和炼苗;本发明通过逐步诱导种子萌发和培养,能够培育出大量紫香兰幼苗上市;本发明采用同株异花授粉得到的种子,提高了种子在特定条件下的发芽率;并且种子萌发培养基配方简单并且原料易得,通过实验证明可以提高紫香兰种子的萌发率;本发明的组培快繁方法具有极高的推广价值。
申请公布号 CN104429964B 申请公布日期 2016.08.24
申请号 CN201410757483.X 申请日期 2014.12.12
申请人 东莞市生物技术研究所 发明人 范俊强;张善信;郑贵朝
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 东莞市冠诚知识产权代理有限公司 44272 代理人 张作林
主权项 一种紫香兰组培快繁方法,其特征在于,步骤包括a、同株异花授粉:取同一植株上开花2‑4天的紫香兰花粉剥下,接到另一朵花的花柱上,并将该花上本身的花粉剥掉;b、无菌播种:授粉成功后80‑120天,取成熟果荚中的种子拨到配好的诱导种子萌发培养基上,放置于培养室内诱导种子萌发;c、原球茎继代增殖:无菌播种1.5‑3个月,种子萌发出绿色的原球茎;将原球茎转到增殖培养基上继代增殖,继代周期为40‑50d;d、原球茎分化:原球茎经过几次继代增殖后,数量已达到生产所需要的量;此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗;e、组培苗生根:原球茎分化成苗后,生长到3‑5cm高,叶片3‑4片时,从基部切下转到生根培养基上生根;生根培养20‑40天,组培苗长出3‑4条根,根长3cm左右时,从组培室转到炼苗室炼苗5‑9天,然后移植到土壤里即得到紫香兰组培苗;所述无菌播种的方法为:先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面,流水冲洗一遍后转到超净工作台上;将果荚尾部花蒂残留切去,然后放在70%酒精中浸泡3‑8S,用无菌水洗;将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒5‑10min,最后用无菌水洗4‑5次;用无菌滤纸吸干果荚表面水分,用解剖刀将果荚从中间纵切,将里面的种子用镊子拨到配好的诱导种子萌发培养基上;所述诱导种子萌发培养基为:1/2MS+NAA0.2‑0.5mg/L+椰汁5%‑10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%,pH为5.6‑5.8;培养室温度25‑26℃,光照时间12h/d,光照强度50‑90μ mol m<sup>‑2</sup>s<sup>‑1</sup>;所述原球茎增殖培养基为:1/2MS+NAA0.5‑1.0mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%,pH为5.6‑5.8;所述分化培养基为:1/2MS+6‑BA1.0‑2.0mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%,pH5.6‑5.8;培养温度25‑26℃,光照时间14h/d,光照强度80‑120μmol m<sup>‑2</sup>s<sup>‑1</sup>;所述生根培养基为:1/3MS+NAA0.2‑0.5mg/L+IBA0.5‑1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%,pH为5.6‑5.8。
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