一种复合酶提取鲜三七中三七总皂苷的方法

摘要

本发明涉及一种复合酶提取中药材中三七总皂苷的方法，属中药领域。特别涉及一种复合酶提取鲜三七中三七总皂苷的方法，本发明采用鲜三七为提取原料，经过粉碎制粒，酶解处理，合并滤液浓缩处理，醇沉处理，洗脱处理和脱色处理从而进行三七总皂苷的提取，将β‑淀粉酶引入酶提取鲜三七中皂苷成分的新工艺中，以鲜三七为原料，缩短传统生产周期，提高三七总皂苷的质量和提取率，本发明有利于云南三七的市场调节、控制能力，实现对乡土企业的技术提升、经济效益增长，从而促进三七产业的可持续发展。

主权项

一种复合酶提取鲜三七中三七总皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步：粉碎制粒，将原料鲜三七材料进行净选，清洗，阴凉处晾干表面水份后用粉碎机破碎成 10‑20 目的鲜颗粒；第二步：酶解处理，将粉碎好的鲜三七 10‑20 目鲜颗粒样品置提取溶器中，加入复合 酶进行酶解处理 2‑3h，其中，复合酶由纤维素酶、果胶酶、β‑淀粉酶、草酸青霉胞外糖苷酶构成，其各成分的添加量为：纤维素酶0.1ml /200g，果胶酶 0.2ml/200g，β‑淀粉酶0.1ml/200g，草酸青霉胞外糖苷酶 0.05ml /200g；进行酶解处理后再加入 6 倍量的 70% 乙醇进行回流提取，提取3次，温度70℃，过滤，收集滤液，备用；第三步：合并滤液，浓缩，真空0.075‑0.08帕减压回收乙醇，温度 70℃，得鲜三七提取液；第四步：醇沉处理，将鲜三七提取用絮凝剂和醇沉乙醇来进行醇沉处理，醇沉时间为 12‑36h，醇沉乙醇浓度为60%‑90%，醇沉次数为1‑3 次，醇沉浓度与样液比例为 1:1‑1:3，絮凝剂浓度为4%‑7%；第五步：洗脱处理，将醇沉处理好的鲜三七提取液通过 D101 大孔吸附树脂柱，树脂用量为原料的1.2‑1.8倍，先用蒸馏水洗脱，后用 60%‑90% 乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，备用；第六步 ：脱色处理，将乙醇洗脱液回收乙醇，浓缩至干，水溶解后通过阴离子交换树脂 D‑941 柱子来脱色，用 65%‑80% 乙醇洗脱，收集流出液，浓缩至干，即得三七总皂苷。