| 摘要 |
Panel primerů a způsob detekce genové exprese molekulárních markerů charakterizujících osteogenní diferenciaci specifickou pro zvířecí modul koně, při němž se s izolovanou DNA z cíleně diferencovaných koňských mesenchymálních buněk do osteocytů (kostních buněk) provede polymerázová řetězová reakce (PCR) s použitím panelu primerů zahrnujícícho alespoň jeden z oligonukleotidových primerových párů: OMD F: 5´ - CAC AAC AAA CTG AAG CAA GCA – 3´ (21-mer), OMD R: 5´ - TGA GGG AAG CAG AGG AAA ATG – 3´ (21-mer), pro detekci genové sekvence osteomodulinu (OMD); ON F: 5´ - GAGAAGGTGTGCAGCAATGA – 3´ (20-mer), ON R: 5´ - GCT TCT CGG TCA GAA GGT TG – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence osteonectinu (ON); RUNX2 F: 5´ - CCC CAA GTA GCC ACC TAT CA – 3´ (20-mer), RUNX2 R: 5´ - GCCTGGGGTCTGTSSTCTGA – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence transkripčního faktoru RUNX2 (RUNX2); OPN F: 5´ - CTG ATT TTT CCA CCG ACG TT – 3´ (20-mer), OPN R: 5´ - ATG TCC TTG CTT TCC ACA GG – 3´ (20-mer), pro detekci genové sekvence osteopontinu (OPN) a následně se provede elektroforéza produktů PCR reakce. Řešení umožňuje rychle, jednoduše a specificky detekovat buňky diferencované do osteocytů pomocí specifických markerů v buněčných izolátech speciálně u živočišného druhu koně. |
