一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法

摘要

本发明公布了一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，属于酶制剂领域。本发明采用梯度降温和梯度升温的发酵工艺显著提高了里氏木霉901-18Trichoderma reesei 901-18的抗应激能力，致使混合菌种的产酶能力最大限度地显现，使得本发明所产耐高温真菌α-淀粉酶酶活力高、作用条件宽泛、稳定性强、适于工业化生产。

主权项

一种变温调节生产耐高温真菌α‑淀粉酶的方法，其特征在于，在发酵罐发酵阶段具体步骤如下：将发酵菌种的一级种子罐发酵液以6％接种量接入发酵罐，培养温度27‑30℃，搅拌速度120‑180r/min，通风量(V/V)1:1‑3,培养时间10‑15h；然后以1‑2℃/h降温速率缓慢降温至10‑15℃，恒温培养15‑20h；继续以1‑2℃/h降温速率缓慢降温至2‑5℃，此时，继续将一级种子罐发酵液以4％接种量追加接入发酵罐，恒温培养20‑30h；最后以1‑2℃/h升温速率缓慢升温至10‑15℃，恒温培养15‑20h；继续以1‑2℃/h升温速率缓慢升温至27‑30℃，恒温培养15‑20h；补料控制：当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml‑8mg/ml时，开始添加补料培养基，补料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml‑5mg/ml；放罐标准：60‑80％菌体衰老自溶，酶活力增长缓慢；发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得耐高温真菌α‑淀粉酶。