一种测定人体甘胆酸含量的试剂盒及制备方法

摘要

一种测定人体甘胆酸含量的试剂盒及制备方法，试剂盒包括：甘胆酸R1试剂；甘胆酸R2试剂和甘胆酸校准品；甘胆酸R1试剂是将甘胆酸-蛋白偶联物与缓冲液充分混合得到，甘胆酸R2试剂是由甘胆酸-蛋白抗体包被的胶乳颗粒与悬浮缓冲液混合得到，甘胆酸校准品是由人源性甘胆酸和缓冲液组成，该方法是将含有甘胆酸的人血浆、血清样本与甘胆酸-蛋白偶联物竞争结合甘胆酸-蛋白抗体胶乳颗粒，与甘胆酸结合的甘胆酸-蛋白抗体胶乳颗粒不产生浊度，而与甘胆酸-蛋白偶联物结合甘胆酸-蛋白抗体胶乳颗粒会产生浊度变化，通过测定反应后体系浊度的降低程度来对甘胆酸进行定量分析。本发明极大地提高了免疫反应的信号强度，使低含量物质在免疫结合时也能产生较强的浊度反应，以供检测。

主权项

一种测定人体甘胆酸含量的试剂盒，其特征在于包括：甘胆酸R1试剂；甘胆酸R2试剂和甘胆酸校准品；所述甘胆酸R1试剂由甘胆酸‑蛋白偶联物和缓冲液组成，所述缓冲液为浓度10‑100mM的Tirs‑HCl溶液，所述缓冲液的pH值为7‑8；所述缓冲液中含有浓度2‑6wt％的PEG‑6000、0.7‑0.9wt％的氯化钠、0.05‑0.1wt％的叠氮钠、0.3wt％的PC‑300、0.1‑1wt％牛血清白蛋白以及20mM EDTA；所述甘胆酸R1试剂中甘胆酸‑蛋白偶联物的浓度为0.05‑2mg/mL；所述甘胆酸‑蛋白偶联物是通过偶联剂将甘胆酸和蛋白偶联后获得；所述甘胆酸‑蛋白偶联物中蛋白浓度为0.1‑2.0mg/mL；所述甘胆酸R2试剂由悬浮缓冲液和甘胆酸‑蛋白抗体包被的胶乳颗粒组成，所述悬浮缓冲液为含有稳定剂和防腐剂的浓度为20‑100mM的甘氨酸‑Na0H缓冲液；所述稳定剂由终浓度0.1‑1.0wt％的牛血清白蛋白、0.7‑0.9wt％的氯化钠、5‑50mM的乙二胺四乙酸二钠、体积浓度0.1‑1.0％TX‑100组成；所述防腐剂为PC‑300，终体积浓度为0.05‑0.1％；所述甘胆酸R2试剂中甘胆酸‑蛋白抗体包被的胶乳颗粒的质量分数为0.05‑1.0％；所述甘胆酸校准品是由人源性甘胆酸和缓冲液组成，所述缓冲液为浓度50‑200mM的Tirs‑HCl溶液，所述缓冲液中含有终浓度0.1‑1wt％的牛血清白蛋白、0.05‑0.5wt％的PC‑300、5‑50mM的乙二胺四乙酸二钠；所述甘胆酸校准品包括人源性甘胆酸浓度分别为0、2.5、5、10、20、40、80ug/ml的一组校准品。