可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌及其制备方法

摘要

本发明提供了一种可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌制备方法，包括：PCR扩增EGFP基因；将PCR扩增获得的EGFP基因与环状质粒载体重组，得到重组质粒；获取待定植动物肠道的大肠杆菌，并进行感受态处理后形成感受态肠道大肠杆菌；将重组质粒导入至感受态肠道大肠杆菌，形成可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌。采用本发明的可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌，工程菌构建过程中采用原始动物肠道的大肠杆菌作为宿主，并采用pCR2.1c-TOPO或pTrcHis B作为载体便于筛选，以及在逆境环境下其本身具有良好的抗性使其更具优良的存活性，相比其他肠道大肠杆菌具备更强的竞争性，并利于长久监测掌握动物肠道菌在逆境下的动态变异规律；而且还可以根据跟踪需求控制其表达。

主权项

一种可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌制备方法，包括如下步骤：PCR扩增EGFP基因；将所述PCR扩增获得的EGFP基因与环状质粒载体重组，得到重组质粒；其中，所述环状质粒载体为pCR2.1c‑TOPO或pTrcHis B获取待定植动物肠道的大肠杆菌，并进行感受态处理后形成感受态肠道大肠杆菌；将重组质粒导入至感受态肠道大肠杆菌，形成转化工程菌，即为可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌。