磁珠法提取细菌基因组DNA的试剂盒及其提取方法

摘要

本发明公开一种磁珠法提取细菌基因组DNA的试剂盒及其提取方法，该试剂盒包括以下七种组分：缓冲液A、缓冲液B、缓冲液C、磁珠悬浮液D、缓冲液E、缓冲液F、缓冲液G，其中磁珠悬浮液D的组成为每200mmol/L氯化钠水溶液中含有50mg单分散Fe₃O₄@SiO₂-AEAPS纳米磁珠；该试剂盒提取方法包括以下六个步骤：菌体重悬、裂解、沉淀核酸、磁珠吸附、洗涤、洗脱。本发明试剂盒采用高效的单分散纳米磁珠并配合独特的缓冲液系统，使得提取出来的细菌基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠，满足后续实验要求。

主权项

一种磁珠法提取细菌基因组DNA的试剂盒，其特征在于：其包括缓冲液A、缓冲液B、缓冲液C、磁珠悬浮液D、缓冲液E、缓冲液F、缓冲液G七种组分；所述缓冲液A终浓度组成为：20‑50mmol/L葡萄糖、10‑30mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐（Tris‑HCl）、5‑20mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA），溶剂为高压灭菌水 (缓冲液A终PH=8.0‑8.5)；所述缓冲液B终浓度组成为：15‑25mg/ml蛋白酶K、1‑5mol/L盐酸胍、5‑25mmol/L柠檬酸钠、1‑2%曲拉通（Triton X‑100）、0.5‑5mmol/L EDTA，溶剂为高压灭菌水 (缓冲液B终PH=4.0‑5.5)；所述缓冲液C成分组成为：无水乙醇溶液；所述缓冲液E终浓度组成为：1‑5mol/L醋酸钠，体积分数为20‑40%无水乙醇，溶剂为高压灭菌水 (缓冲液E终PH=4.0‑5.5)；所述缓冲液F终浓度组成为：10‑30mmol/L Tris‑HCl、0.5‑5mmol/L 0.5‑5mmol/L EDTA、5‑25mmol/L柠檬酸钠和无水乙醇，0.3‑0.7 L/L的无水乙醇，溶剂为高压灭菌水 (缓冲液F终PH=8.0‑8.5)；所述缓冲液G终浓度组成为：10‑30mmol/L Tris‑HCl、0.5‑5mmol/L EDTA，溶剂为高压灭菌水 (缓冲液G终PH=8.0‑8.5)；所述磁珠悬浮液D成分组成为：每200mmol/L氯化钠水溶液中含有50mg单分散Fe₃O₄@SiO₂‑AEAPS纳米磁珠。