一种血浆肾素活性的测定方法及其应用

摘要

本发明公开了一种血浆肾素活性的测定方法和应用，本发明通过酶促反应-血管紧张素I的生成进而免疫测定，以B/T(%)或B/B0(%)的自然对数为横坐标，以标准品的血管紧张素I浓度为横坐标作图。对应样品37℃或4℃各自位于横坐标的B/T(%)或B/B0(%)自然对数值，读出纵坐标相应的血管紧张素I浓度。计算血浆肾素活性：血浆肾素活性是间接测定每小时体外生成血管紧张素I的量。由37℃生成的血管紧张素I浓度减去4℃的基础浓度得到。通过本发明提供的血浆肾素活性的测定方法，所得出的血浆肾素活性可以应用于计算醛固酮/肾素比值（ARR），进而可以早期诊断高血压患病情况。

主权项

一种血浆肾素活性的测定方法，其特征在于：其步骤为：1）准备储存液：a、准备酶促反应抑制液：在小管内加入标注体积的去离子水，轻轻混匀，抑制液应贮存在2‑8℃；b、贮备冲洗液：把小管内液体倒入950ml去离子水中，混匀，贮存在2‑8℃；2）酶促反应‑血管紧张素I的生成：a、在200ul样品血清中加入200ul预冷的酶促反应抑制液，轻轻混匀；b、把每份混合液平均分成两份200ul，分别转移到两个小管中；c、把第一份小管液放入4℃水浴中，振荡孵育1小时，用来测定血管紧张素I的基础浓度；d、把第二份小管液放入37℃水浴中，振荡孵育1小时，用来测定生成的血管紧张素I浓度；e、孵育结束，把第二份小管液从37℃迅速降温至4℃；3）免疫测定：在抗体包被管内依次加入50ul标准品、50ul经37℃和4℃孵育的三份样品加入示踪剂200ul，混匀；18‑25℃振荡孵育2小时，振速大于280rpm；除空白管外，终止孵育；用2ml冲洗液冲洗；终止两次；测定活性一分钟；标准曲线：以B/T(%)或B/B0(%)的自然对数为横坐标，以标准品的血管紧张素I浓度为横坐标作图；样品血清：对应样品37℃或4℃各自位于横坐标的B/T(%)或B/B0(%)自然对数值，读出纵坐标相应的血管紧张素I浓度；计算血浆肾素活性：血浆肾素活性是间接测定每小时体外生成血管紧张素I的量；由37℃生成的血管紧张素I浓度减去4℃的基础浓度得到。