一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法

摘要

本发明公开了一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法，该方法用活化的三联吡啶钌复合物为电化学发光标记物，它可以通过分子上的N-羟基琥珀酰亚胺酯与指印氨基酸中的氨基发生共价结合，从而标记并固定在指纹上；继而在一定电位下与溶液中的共反应剂（二正丁基乙醇胺）发生电化学发光反应，从而显现出指纹的纹路，包括整体形貌（一级结构）和细节特征（二级结构）；本发明采用的电化学发光技术不需要外加激发光源、不存在背景光，且大大降低了发光剂的自猝灭现象，明显优于传统荧光成像法；该成像技术能够迅速获取图像，远远快于扫描电化学显微镜；使用的电化学发光共反应剂为二正丁基乙醇胺，它具有发光强度大、环境友好的特点。

主权项

1.一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法，该方法在电化学发光成像系统上实现；电化学发光成像系统包括电化学反应池、恒电位控制仪和CCD照相机，电化学反应池包括底座和池体，底座上具有凹槽，池体中空，通过O型密封圈和螺丝固定在凹槽上，池体一侧有一小孔；恒电位控制仪包括工作电极、对电极和参比电极，参比电极安放在小孔内，其中，工作电极为ITO（铟锡氧化物导电玻璃），对电极为铂环，参比电极为Ag/AgCl电极或Ag电极；其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）电极预处理：将工作电极依次在丙酮、乙醇和去离子水中各超声清洗10-20min，再用去离子水彻底冲洗干净，用氩气吹干；（2）指印样本制备：用胶带将不同客体上的指印提取下来，然后转移到工作电极上，形成指印样本；（3）用活化的三联吡啶钌复合物标记指印：将50活化的三联吡啶钌复合物涂覆在指印样本上，盖上表面皿防止溶液挥发，在室温下反应30min以上，用去离子水冲洗样本以除去未反应的复合物，用氩气吹干；（4）电化学发光成像：将上述处理的工作电极、对电极和参比电极置于电化学反应池中，然后将含共反应剂的反应溶液加入电化学反应池中，恒电位控制仪通电，CCD照相机采集指纹图像；所述反应溶液由在每升磷酸盐缓冲溶液中加入50mmol二正丁基乙醇胺和0.15mol氯化钠组成，磷酸盐缓冲溶液的pH为7.4，恒电位控制仪的电位为1.3V。