通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法

摘要

本文公开了一种通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法，该方法可适用于多种动物细胞并且在存活率和基因转移效率方面得到极其显著提高。本文还公开了一种甚至在没有使用专用转移缓冲液的时候能够通过电穿孔技术以高存活率和基因转移效率引入外源基因的方法。还公开了一种通过电穿孔技术进行的外源基因转移方法，其特征在于在特定条件下将第一电脉冲(强脉冲)和第二电脉冲(弱脉冲)连续施加于动物细胞，和显著提高存活率和基因转移效率；以及通过电穿孔技术进行的上述外源基因转移方法，其中可用于培养所述细胞的液体培养基被用作转移缓冲液。

主权项

一种通过电穿孔技术将外源基因转移至动物细胞的方法，所述方法包括：将具有至少300 V/cm或更大的电场强度的第一电脉冲施加于动物细胞，使得总热量强度为0.2‑40 J/100μL；和施加具有至少15 V/cm或更大的电场强度的第二电脉冲，使得每次脉冲的热量强度为0.01‑5 J/100μL。