一种绿棉胚性愈伤组织的诱导和培养方法

摘要

本发明公开了一种绿棉胚性愈伤组织的诱导和培养方法，包括有以下步骤：绿棉种子消毒后剥去种皮进行培养，得到无菌苗下胚轴；无菌苗下胚轴置于绿棉愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养；转接至绿棉愈伤组织增殖培养基并继代培养；转入绿棉愈伤组织分化培养基，继代培养得到胚性愈伤组织；再进行扩繁培养。本发明的有益效果为：本发明提供的绿棉胚性愈伤组织的诱导和培养方法，耗时短，诱导率高，拓展了可再生棉花的基因型，适应于彩棉的绿棉品种，对彩棉转基因育种的发展壮大具有积极作用。

主权项

一种绿棉胚性愈伤组织的诱导和培养方法，其特征在于，包括有以下步骤：1）绿棉种子以硫酸脱绒后，再经过消毒洗涤，得到无菌绿棉种子，再将无菌绿棉种子在无菌环境下剥去种皮并接种于1/2MS固体培养基中，在光暗交替条件下进行培养，得到无菌苗下胚轴；2）将步骤1）得到的无菌苗下胚轴在无菌条件下切为5‑8mm小段，并置于绿棉愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养30天，得到初级培养绿棉愈伤组织；3）将步骤2）得到的初级培养绿棉愈伤组织转接至绿棉愈伤组织增殖培养基并继代培养2次，得到增殖后绿棉愈伤组织；4）将步骤3）得到的增殖后绿棉愈伤组织转入绿棉愈伤组织分化培养基，继代培养2‑3次后，得到胚性愈伤组织；5）将步骤4）得到的胚性愈伤组织置于绿棉胚性愈伤组织增殖培养基上，进行扩繁培养。