发明名称 具有毒杀松材线虫活性的化合物及其应用
摘要 本发明涉及一种具有毒杀松材线虫活性的化合物及其应用,该化合物,由生产菌株,采用固体发酵及提取分离的方法获得。其生产菌株为拟青霉菌(Paecilomyces),该菌已于2007年12月27日保藏在科学院微生物所,保藏号为CGMCC No.2308。本发明的该类活性化合物由Cerebroside A和Cerebroside B两种化合物组成。本发明的该类化合物,能有效的毒杀松材线虫,可单独或组合制备毒杀松材线虫农药的应用。
申请公布号 CN101481712B 申请公布日期 2012.01.04
申请号 CN200810055785.7 申请日期 2008.01.09
申请人 中国科学院微生物研究所 发明人 车永胜;刘杏忠;张永刚;向梅春;刘述春
分类号 C12P13/02(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I;A01N33/04(2006.01)I;A01P5/00(2006.01)I;C12R1/79(2006.01)N 主分类号 C12P13/02(2006.01)I
代理机构 中科专利商标代理有限责任公司 11021 代理人 周长兴
主权项 1.一种具有毒杀松材线虫活性的化合物制备方法,由拟青霉菌(Paecilomyces),采用固体发酵及提取分离的方法得到化合物Cerebroside A和Cerebroside B,其结构式为:<img file="FSB00000590151000011.GIF" wi="1193" he="232" />在化合物Cerebroside A中,结构式中的R为:<img file="FSB00000590151000012.GIF" wi="920" he="189" />化合物Cerebroside B中,结构式中的R为:<img file="FSB00000590151000013.GIF" wi="919" he="191" />具体制备方法为:a)真菌拟青霉菌(Paecilomyces)的活化:PDA培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15g,水1000mL,制成试管斜面,挑取菌丝体接种于试管斜面上,25℃培养7天;所述真菌拟青霉菌为2007年12月27日保藏在中国科学院微生物所,保藏号为CGMCC No.2308的拟青霉菌;b)真菌拟青霉菌(Paecilomyces)的固体发酵培养:大米培养基制备过程为:将100g大米和100mL水加入500mL三角瓶中,浸泡过夜,灭菌冷却待用;将制备好的菌悬液5mL接种于大米培养基上,25℃培养40天;菌悬液的孢子浓度为1×10<sup>6</sup>个/mL;c)待发酵完毕,将乙酸乙酯加入三角瓶中提取三次,减压蒸干有机溶剂,得到粗提物;d)将粗提物用石油醚-乙酸乙酯-甲醇体系进行减压硅胶柱层析;e)在活性跟踪指导下,将活性组分通过Sephdex-LH 20分离,将活性馏份通过HPLC制备得到化合物Cerebroside A和Cerebroside B。
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