发明名称 |
一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器 |
摘要 |
一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器,属于分子生物学及微生物学技术领域,其特征是:将质粒pK-3α-GFP3和p6共转化进大肠杆菌中,在重组质粒pK-3α-GFP3的顺势β-半乳糖苷酶启动子基因下游依次插入了3α-HSD启动子等调控序列468碱基对及GFP报告基因722碱基对;当环境中存在雌激素等底物时,可以诱导p6质粒上3α-HSD的调控序列表达调控作用的蛋白。有益效果是:检测范围比其它检测方法高出3个数量级以上,利用质粒pTopo-3α-GFP3对绿色荧光蛋白的表达具有放大、增强效应,与原绿色荧光蛋白标记的传感器相比,不同甾体类激素、多环芳烃的标准检测液的检测线性范围可高出1到6个数量级。检测时间较短。具有检测体积小,稳定、快速、高效的特点。 |
申请公布号 |
CN102147364A |
申请公布日期 |
2011.08.10 |
申请号 |
CN201010595097.7 |
申请日期 |
2010.12.20 |
申请人 |
长春理工大学 |
发明人 |
于源华;杨佳新;于化东;何秀霞;张淑华;葛淑敏;马书林;侯巍 |
分类号 |
G01N21/64(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I |
主分类号 |
G01N21/64(2006.01)I |
代理机构 |
长春众益专利商标事务所(普通合伙) 22211 |
代理人 |
纪尚 |
主权项 |
一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器,其特征是:将质粒pK‑3α‑GFP3和p6共转化进大肠杆菌中,建立了一种绿色荧光蛋白标记的微生物荧光检测系统;在重组质粒pK‑3α‑GFP3的顺势β‑半乳糖苷酶启动子基因下游依次插入了3α‑HSD启动子等调控序列468碱基对及GFP报告基因722碱基对;重组质粒p6含有3α‑HSD全部调控基因,共5200碱基对;当环境中存在雌激素等底物时,可以诱导p6质粒上3α‑HSD的调控序列表达调控作用的蛋白,该蛋白可使质粒pK‑3α‑GFP3上的启动子启动进而表达出GFP蛋白,此时GFP的表达量严格受到诱导底物量的控制。 |
地址 |
130022 吉林省长春市朝阳区卫星路7989号长春理工生命科学院 |