重组火鸡疱疹病毒细菌人工染色体转移载体

摘要

本发明涉及重组火鸡疱疹病毒细菌人工染色体转移载体，属于生物制药领域。从E.coli DH5α染色体DNA中扩增黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸转移酶基因gpt基因，与质粒pEGFP中的CMV启动子及poly(A)连接，，插入到质粒pUAB中，构建带有Egpt的重组克隆质粒pUAB-gpt。用pUC18克隆单拷贝BAC载体制备高拷贝BAC载体基本功能序列，插入到pUAB-gpt中，获得重组火鸡疱疹病毒细菌人工染色体转移载体pUAB-gpt-BAC，含gpt基因表达盒的核心序列BAC-gpt，具有氨苄青霉素和氯霉素双抗性。本发明构建的转移载体具有研制重组HVT活病毒载体基因工程疫苗的应用前景。

主权项

重组火鸡疱疹病毒HVT细菌人工染色体BAC转移载体pUAB-gpt-BAC，其大小为16 100bp，HVT非必需区US2两侧同源臂A和B之间为8800bp，含黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸转移酶基因XGPRT，简称gpt基因，gpt基因表达盒Egpt的核心序列为BAC-gpt，具有氨苄青霉素和氯霉素双抗性。