T载体及其构建方法与其前T载体

摘要

本发明公开了T载体及其构建方法与其前T载体。该T载体，是3′端均带有单个T突出末端的线性双链DNA质粒，其中，在一个3′T突出末端的内侧连接有attL1序列，在另一个3′T突出末端的内侧连接有attL2序列。其制备方法包括以下步骤：1)制备含有attL1－attL2盒的前T载体；所述attL1－attL2盒包括AhdI盒和位于所述AhdI盒上游的attL1序列以及位于所述AhdI盒下游的attL2序列；所述AhdI盒包括间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列；2)用AhdI或AhdI的同裂酶酶切步骤1)中的前T载体，得到T载体。该T载体可作为入门载体。

主权项

1、前T载体，是含有attL1-attL2盒的双链环状质粒；所述attL1-attL2盒包括AhdI盒和位于所述AhdI盒上游的attL1序列以及位于所述AhdI盒下游的attL2序列；所述AhdI盒包括间隔DNA序列以及连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列。