| 主权项 |
1﹒一种胰岛素前置体之不正确重组体之复性方法,其包括在水性介质中于一种有机氧化还原系统或至少一种于反应条件下形成此种有机氧化还原系统之有机化合物存在下,将不正确重组体与过量硫醇反应。2﹒如申请专利范围第1项之方法,其中所使用之胰岛素前置体之不正确重组体系式I之具有开放性─S─S─架桥之胰岛素前置体在重组时所产生之副产物其中R1=H或一种可依化学法或酵素法切掉的胺基酸或胜基团,R2=OH或一种胺基酸或胜基团,以OH较佳,R3=H或一种Cys─S保护基,以─SO3─或第三丁基较佳,X=一种连接胰岛素A和B链的基团,以一种胺基酸或胜基团较佳,Y=一种可遗传编码之胺基酸基团,以Thr,Ala或Ser较佳,Thr更佳,Z=一种可遗传编码之胺基酸基团,以Asn,Gln,Asp,Clu,GH,Ser,Thr,Ala或Met较佳,Asn更佳,而且A1─A20和B1─B29=未经变异或经置换一或多个胺基酸而变异之胰岛素胜序列,以未经变异之人、猪或牛的胰岛素之胜序列较佳,人或猪的胰岛素者更佳。3﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中反应系在不正确重组体浓度约为0﹒1到100毫克/毫升,以约0﹒1到10毫克/毫升较佳之浓度下进行。4﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中硫醇系使用乙硫醇及/或半胱胺酸。5﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中反应系使用相当于硫醇SH基/半胱胺酸S单位(在不正确重组体上)之比率至少约为5,以5到100较佳之过量硫醇来进行。6﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中所用的有机氧化还原系统系一对化合物,其中之一成份为一种具有式Ⅱ构造要素之有机化合物或一种芳香族邻一或对一二羟基化合物,而另一成份为一种具有或Ⅱ构造要素氧化形成(=式Ⅱ^1之构造要素)(Ⅱ^1)7﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中所使用之于反应条件下形成一种有机氧化还原系统之有机化合物系一或多种于申请专利范围第6项中提及之各别成份。8﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中所使用之有机氧化还原系统系下列成对化合物:抗坏血酸+脱氧抗坏血酸,焦儿茶酚+邻─或氢+对─且所使用之可于反应条件下形成此种氧化还原系统之有机化合物仅系每对化合物中之一种成份。9﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中反应系于抗坏血酸及/或脱氢抗坏血酸之存在下进行。10﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中硫醇和形成有机氧化还原系统之化合物之用量系之1克当量之硫醇对1/10,000到10,000莫耳(1/10到10莫耳较佳)之形成有机氧化还原系统之化合物之比率来使用。11﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中水性反应介质含有溶解之尿素,其在约为0﹒1到1莫耳体积浓度较佳,而约为0﹒1到0﹒5莫耳体积浓度更佳。12﹒如申请专利范围第1项或第2项之方法,其中反应系在约7和12之间的pH下进行,而在约9﹒5和11之间更佳。 |
