Composiciones de extremo del transposón y métodos para modificar ácidos nucleicos

摘要

Un método para la secuenciación paralela de un ADN diana que comprende: a) proporcionar una biblioteca de fragmentos lineales de ADN diana que comprende un primer extremo de transposón y un primer dominio de rótulo de amplificación fijado al extremo 5' de los fragmentos de ADN diana y un segundo extremo de transposón y un segundo dominio de rótulo de amplificación fijado del extremo 5' de la cadena complementaria de los fragmentos de ADN diana en donde los extremos del transposón se fijan a los fragmentos de ADN a través de una reacción de transposición in vitro que comprende una pluralidad de transposomas, cada transposoma comprende una transposasa y extremos de transposones, b) desnaturalizar la biblioteca de fragmentos lineales de ADN para generar fragmentos de ADN monocatenarios, c) capturar los fragmentos de ADN monocatenarios en un sustrato bajo condiciones en las que una porción de los fragmentos son capturados sobre el sustrato, y d) secuenciar en forma paralela los fragmentos de ADN capturados, en donde los fragmentos de ADN capturados se secuencian simultáneamente en un solo formato múltiplex.